石蠟切片把修好的蠟塊裝在旋轉(zhuǎn)切片機(jī)上，即可進(jìn)行切片。切片必須保持切片刀銳利，切片厚度通常為5-7um，也可根據(jù)染色需要切成不同厚度，一般電腦冷凍石蠟切片機(jī)不超過(guò)10um。切好的蠟帶，放人40℃左右的溫水中將蠟片展平。良好的切片應(yīng)無(wú)刀痕、裂痕，切片厚度均一平整。切片如有上述問(wèn)題，在進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色時(shí)會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性現(xiàn)象。為能得到平整無(wú)皺褶的組織切片。可采用兩次展片，即先將組織切片漂浮在30％的乙醇溶液中進(jìn)行次展片，然后將切片撈起，再次放人45-50℃的水浴中進(jìn)行第二次展片，乙醇的濃度和水溫可視組織不同和石蠟熔點(diǎn)的高低自行調(diào)整。此過(guò)程是利用乙醇溶液與水之間的張力差展開(kāi)切片的皺褶。為防止脫片，載玻片要涂黏片劑。對(duì)HE染色的切片，可在載玻片上涂抹薄層蛋白甘油，但蛋白甘油因含蛋白易導(dǎo)致非特異性免疫反應(yīng)，故用于免疫組織化學(xué)染色的切片常用多聚賴(lài)氨酸、3—氨丙基—乙氧基甲硅烷等處理。

　　冰凍切片是酶組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)染色中常用的一種切片方法，其突出的優(yōu)點(diǎn)是能夠較完好地保存細(xì)胞膜表面和細(xì)胞內(nèi)多種酶活性以及抗原的免疫活性，尤其是細(xì)胞表面抗原更應(yīng)采用冰凍切片。新鮮組織和已固定的組織均可作冰凍切片。為了得到的冰凍切片，選擇好的冰凍切片機(jī)和配套的切片機(jī)可以把新鮮組織切成20-400pm的厚片，以漂浮法在反應(yīng)板內(nèi)進(jìn)行組織化學(xué)或免疫組織化學(xué)染色。因組織不冷凍，無(wú)冰晶形成也無(wú)組織抗原破壞，染色前又避免了組織脫水、透明、包埋等步驟對(duì)抗原的損害，故能較好地保留組織內(nèi)脂溶性物質(zhì)和細(xì)胞膜抗原。振動(dòng)切片主要用于顯示神經(jīng)系統(tǒng)抗原分布的研究。對(duì)于柔軟的胚胎腦組織，可用低熔點(diǎn)10％瓊脂糖包埋，振動(dòng)切片機(jī)切成厚片，采用漂浮法在反應(yīng)板內(nèi)進(jìn)行免疫熒光組織化學(xué)染色，激光掃描共聚焦顯微鏡觀察。

　　振動(dòng)切片方法是利用刀片振動(dòng)原理，用來(lái)將新鮮的活體組織或固定過(guò)的組織切成20um的薄片到1mm以上厚片的儀器。一般厚度度控制大約為1um，如果做熒光染色建議切成薄片。

　　幾中切片的比較：

　　振動(dòng)切片方法簡(jiǎn)單、快速，能使組織比較完整保留，適合做或組織電生理學(xué)等研究。與冰凍切片相比，不需要對(duì)組織冷凍，不會(huì)形成冰晶或造成組織抗原的破壞。與石蠟切片相比，不需要脫水、透明、浸蠟等過(guò)程，避免對(duì)抗原的損害。